熒光定量pcr儀數(shù)據(jù)分析水平如何？
發(fā)布時間：2014-12-04 閱讀：948次
、熒光定量pcr儀數(shù)據(jù)分析水平
熒光定量pcr儀，由熒光定量系統(tǒng)和計算機(jī)組成，用來監(jiān)測循環(huán)過程的熒光。與實時設(shè)備相連的計算機(jī)收集熒光數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)通過開發(fā)的實時分析軟件以圖表的形式顯示。原始數(shù)據(jù)收集后可以開始分析。實時設(shè)備的軟件能使收集到的數(shù)據(jù)進(jìn)行正?；幚韥韽浹a(bǔ)背景熒光的差異。正?；罂梢栽O(shè)定域值水平，這就是分析熒光數(shù)據(jù)的水平。
第二、熒光定量pcr儀應(yīng)用領(lǐng)域介紹
1.定量實驗：病原體定量檢測；動、植物轉(zhuǎn)基因檢測等。
2.相對定量實驗：表達(dá)差異分析等；gDNA拷貝數(shù)變化(CNV)差異分析；甲基化差異分析等。
3.定性分析實驗：等位基因/SNP差異分析；病原體定性檢測及耐藥分析；生物品種鑒定等。
4.蛋白穩(wěn)定性實驗：化合物篩選，蛋白穩(wěn)定性方面的研究等。
第三、熒光定量pcr儀的快速熱循環(huán)
實時熒光定量 PCR 系統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)模式采用 25-100 微升反應(yīng)體積，可以采用 96 孔板或單管 /8 聯(lián)管進(jìn)行實驗反應(yīng)。另外7500 還可以升級為快速熱循環(huán)樣品基座，該升級為選購件?？焖贌嵫h(huán)樣品基座采用 96 孔反應(yīng)板，這種反應(yīng)板的管內(nèi)液體上方的空間較小，可以支持 5-30 微升反應(yīng)體積的實驗。
第四、PCR
樣品到達(dá)域值水平所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)稱為Ct值。域值應(yīng)設(shè)定在使指數(shù)期的擴(kuò)增效率為大，這樣可以獲得準(zhǔn)確，可重復(fù)性的數(shù)據(jù)。如果同時擴(kuò)增的還有標(biāo)有相應(yīng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，線性回歸分析將產(chǎn)生一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，可以用來計算未知樣品的濃度。
第五、如何選擇合適的定量PCR儀
定量的儀器建議買進(jìn)口的，技術(shù)相對成熟一些，而且產(chǎn)地也要在國外。有很多進(jìn)口品牌是在設(shè)廠的。然后就是價格，有的價格高，有的價格低，相同價格下就看性能了。就像買一樣，高端的很多功能根本用不上，低端的又根本不能用，選擇合適自己的。
熒光定量pcr儀，由熒光定量系統(tǒng)和計算機(jī)組成，用來監(jiān)測循環(huán)過程的熒光。與實時設(shè)備相連的計算機(jī)收集熒光數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)通過開發(fā)的實時分析軟件以圖表的形式顯示。原始數(shù)據(jù)收集后可以開始分析。實時設(shè)備的軟件能使收集到的數(shù)據(jù)進(jìn)行正?；幚韥韽浹a(bǔ)背景熒光的差異。正?；罂梢栽O(shè)定域值水平，這就是分析熒光數(shù)據(jù)的水平。
第二、熒光定量pcr儀應(yīng)用領(lǐng)域介紹
1.定量實驗：病原體定量檢測；動、植物轉(zhuǎn)基因檢測等。
2.相對定量實驗：表達(dá)差異分析等；gDNA拷貝數(shù)變化(CNV)差異分析；甲基化差異分析等。
3.定性分析實驗：等位基因/SNP差異分析；病原體定性檢測及耐藥分析；生物品種鑒定等。
4.蛋白穩(wěn)定性實驗：化合物篩選，蛋白穩(wěn)定性方面的研究等。
第三、熒光定量pcr儀的快速熱循環(huán)
實時熒光定量 PCR 系統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)模式采用 25-100 微升反應(yīng)體積，可以采用 96 孔板或單管 /8 聯(lián)管進(jìn)行實驗反應(yīng)。另外7500 還可以升級為快速熱循環(huán)樣品基座，該升級為選購件?？焖贌嵫h(huán)樣品基座采用 96 孔反應(yīng)板，這種反應(yīng)板的管內(nèi)液體上方的空間較小，可以支持 5-30 微升反應(yīng)體積的實驗。
第四、PCR
樣品到達(dá)域值水平所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)稱為Ct值。域值應(yīng)設(shè)定在使指數(shù)期的擴(kuò)增效率為大，這樣可以獲得準(zhǔn)確，可重復(fù)性的數(shù)據(jù)。如果同時擴(kuò)增的還有標(biāo)有相應(yīng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，線性回歸分析將產(chǎn)生一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，可以用來計算未知樣品的濃度。
第五、如何選擇合適的定量PCR儀
定量的儀器建議買進(jìn)口的，技術(shù)相對成熟一些，而且產(chǎn)地也要在國外。有很多進(jìn)口品牌是在設(shè)廠的。然后就是價格，有的價格高，有的價格低，相同價格下就看性能了。就像買一樣，高端的很多功能根本用不上，低端的又根本不能用，選擇合適自己的。
