熒光定量pcr儀不同凡響的技術(shù)應(yīng)用
發(fā)布時間:2014-06-23 閱讀:461次
摘要:隨著熒光定量pcr儀技術(shù)普及,它的功能及技術(shù)如下,在使用中需要注意它的技術(shù)參數(shù),下面給詳細分析。
、熒光定量pcr儀技術(shù)普及
隨著熒光定量PCR技術(shù)的使用,在傳統(tǒng)的96孔板儀器上大作改進。先是Stratagene的Mx3000p在檢測上突破了使用CCD改用PMT檢測熒光信號,大大提高了實驗的靈敏度,但激發(fā)光源仍然沿用傳統(tǒng)的鹵鎢燈并且沒有梯度功能。
1.溫度精度:設(shè)置值/顯示溫度的±0.25℃。
2.溫度均一性:±0.5℃。
3.光學(xué)系統(tǒng):五色激發(fā)光濾光片,五色發(fā)射光濾光片和CCD成像系統(tǒng)
4.數(shù)據(jù)采集:對所有反應(yīng)孔收集的所有五色濾片的數(shù)據(jù),試驗結(jié)束后反應(yīng)板設(shè)置可修改。
5.定量PCR運行時間:不超過2小時。
6.軟件:應(yīng)用軟件(基于標準曲線的定量、相對標準曲線、基于比較Ct值的相對定量、融解曲線分析、存在/不存在、基于或非基于實時擴增的基因分型)。
第二、熒光定量pcr儀檢測模式
1.光源為氙反射燈或鹵鎢燈激發(fā)照射,光源使用時間可監(jiān)測。
2.采用CCD一次成像,96孔同步處理。
3.檢測通道: 5通道,支持多重或多色PCR。
4.可應(yīng)用技術(shù)方法:支持熒光染料、雜交探針、TaqMan、分子信標等檢測技術(shù)方法。
5.升溫速度: ≥4℃, 還可隨時增加PCR循環(huán)數(shù);溫控:準確性≤±0.1℃;溫度均一性≤±0.25℃。
6.同時檢測96個0.2ml樣品。 檢測樣品容量10-100ul。
7.檢測模式:實時動態(tài)在線監(jiān)測,擴增和檢測同時進行。
8.檢測靈敏度,能檢測人類基因組中的單拷貝基因。