唾液學(xué)檢測在非洲豬瘟定點(diǎn)清除技術(shù)中的應(yīng)用
發(fā)布時(shí)間：2019-08-16 閱讀：229次
非洲豬瘟是一種緩慢傳播的接觸性感染性疾病，從窗口期感染到全身性感染（病毒血癥）需要具備一定的條件，較長的窗口期呈現(xiàn)也為凈化非洲豬瘟提供了防控時(shí)機(jī)。其中，唾液學(xué)的非洲豬瘟病毒檢測是實(shí)現(xiàn)早期凈化的重要方法之一，建議推廣使用。
非洲豬瘟疫情嚴(yán)重影響了我國的生豬生產(chǎn)和肉食供應(yīng)，造成了養(yǎng)豬行業(yè)的大災(zāi)難?？v其原因，雖然眾說紛紜，但檢測方法的失當(dāng)是導(dǎo)致疫情泛濫的重要原因之一。
通用的非洲豬瘟血液學(xué)檢測方法是完全錯(cuò)誤的，采血過程的污染程度是不可估量的，檢測操作過程是其危險(xiǎn)的，同時(shí)血液學(xué)檢測結(jié)果也是嚴(yán)重滯后的。非洲豬瘟病毒的感染分為兩個(gè)重要階段：局部感染和全身感染。前者主要發(fā)生在口腔等咽喉部位（有時(shí)鼻腔也會(huì)被污染），后者則形成嚴(yán)重的病毒血癥。這兩個(gè)階段并不是缺一不可的，多數(shù)豬群往往僅 僅發(fā)生局部感染。若飼養(yǎng)管理方法不科學(xué)，則終形成全身感染，發(fā)生嚴(yán)重的非洲豬瘟臨床癥狀。通過加強(qiáng)管理，將感染限制在局部感染階段是實(shí)現(xiàn)安全生產(chǎn)的重要保證。
口腔內(nèi)局部感染階段也是非洲豬瘟窗口期檢測的重要時(shí)機(jī)，是實(shí)現(xiàn)傳染病控制原則“早、快、嚴(yán)、小”的重要保證。探索非洲豬瘟唾液學(xué)檢測方法具有重要的科學(xué)指導(dǎo)意義和生產(chǎn)實(shí)踐意義。
1、唾液樣本的采集：獲得新鮮的唾液（saliva）樣本是準(zhǔn)確診斷的前提條件之一?，F(xiàn)行的鼻拭子（nasal swab）采樣、口腔拭子（oral swab）采樣以及肛門拭子（anal swab）采樣存在樣本陳舊、樣本容易干燥、漏檢率高等問題，已被逐漸淘汰。
2、唾液樣本中的病原半衰期：唾液中含有豐富的具備活性的酶。機(jī)體健康狀態(tài)不同，酶的含量也千差萬別，從而導(dǎo)致唾液中的病原體半衰期（half-life period）長短不一，對(duì)于非洲豬瘟病毒來說，長者 2～3 天，短者 1～2 小時(shí)不等。病原半衰期的存在是導(dǎo)致唾液學(xué)非洲豬瘟病毒漏檢率稍高的重要因素之一。
3、唾液樣本的核酸保護(hù)：采集唾液樣本之前加入適量的樣本保護(hù)劑（Sample Protesis®），可以延長病原半衰期并保持唾液活性，含有保護(hù)液的唾液樣本可以冷藏/冷凍運(yùn)輸及保存。
4、唾液樣本的檢測要求：采集的唾液樣本要求清亮、透明并不得含有食物殘?jiān)?，故采樣之前的停食至關(guān)重要，原則上要求停食 12 小時(shí)以上。含有保護(hù)液的唾液中的核酸可以采用濃集法（concentration method）檢測，即離心唾液，試管底部取樣。
5、唾液樣本檢測對(duì)試劑盒的要求：由于口腔內(nèi)的非洲豬瘟病毒感染往往處于初始階段，病原核酸含量相對(duì)較低（CT 值在25～30 之間，未加保護(hù)液的唾液樣本 CT 值往往在 32 以上），所以對(duì)非洲豬瘟病毒核酸檢測試劑盒的敏感性要求較高，要求盡量能夠?qū)崿F(xiàn)單拷貝（single copy）檢測。
6) 陽性結(jié)果處置：對(duì)于唾液檢測中非洲豬瘟陽性結(jié)果（+），存 在兩種處置方案。一是嚴(yán)格剔除（“拔牙”，stamp out）陽性豬只，實(shí)現(xiàn)凈化生產(chǎn)。二是控制陽性豬群的移動(dòng)，嘗試實(shí)施早期帶毒生產(chǎn)（局部感染而非病毒血癥），終實(shí)現(xiàn)凈化生產(chǎn)。
很多養(yǎng)豬科技工作者把帶毒生產(chǎn)簡單理解為血液中可以帶毒是非常危險(xiǎn)的，也是禁止的。只有控制局部感染才有凈化豬群，消除病毒攜帶狀態(tài)的可能性。
非洲豬瘟疫情嚴(yán)重影響了我國的生豬生產(chǎn)和肉食供應(yīng)，造成了養(yǎng)豬行業(yè)的大災(zāi)難?？v其原因，雖然眾說紛紜，但檢測方法的失當(dāng)是導(dǎo)致疫情泛濫的重要原因之一。
通用的非洲豬瘟血液學(xué)檢測方法是完全錯(cuò)誤的，采血過程的污染程度是不可估量的，檢測操作過程是其危險(xiǎn)的，同時(shí)血液學(xué)檢測結(jié)果也是嚴(yán)重滯后的。非洲豬瘟病毒的感染分為兩個(gè)重要階段：局部感染和全身感染。前者主要發(fā)生在口腔等咽喉部位（有時(shí)鼻腔也會(huì)被污染），后者則形成嚴(yán)重的病毒血癥。這兩個(gè)階段并不是缺一不可的，多數(shù)豬群往往僅 僅發(fā)生局部感染。若飼養(yǎng)管理方法不科學(xué)，則終形成全身感染，發(fā)生嚴(yán)重的非洲豬瘟臨床癥狀。通過加強(qiáng)管理，將感染限制在局部感染階段是實(shí)現(xiàn)安全生產(chǎn)的重要保證。
口腔內(nèi)局部感染階段也是非洲豬瘟窗口期檢測的重要時(shí)機(jī)，是實(shí)現(xiàn)傳染病控制原則“早、快、嚴(yán)、小”的重要保證。探索非洲豬瘟唾液學(xué)檢測方法具有重要的科學(xué)指導(dǎo)意義和生產(chǎn)實(shí)踐意義。
1、唾液樣本的采集：獲得新鮮的唾液（saliva）樣本是準(zhǔn)確診斷的前提條件之一?，F(xiàn)行的鼻拭子（nasal swab）采樣、口腔拭子（oral swab）采樣以及肛門拭子（anal swab）采樣存在樣本陳舊、樣本容易干燥、漏檢率高等問題，已被逐漸淘汰。
2、唾液樣本中的病原半衰期：唾液中含有豐富的具備活性的酶。機(jī)體健康狀態(tài)不同，酶的含量也千差萬別，從而導(dǎo)致唾液中的病原體半衰期（half-life period）長短不一，對(duì)于非洲豬瘟病毒來說，長者 2～3 天，短者 1～2 小時(shí)不等。病原半衰期的存在是導(dǎo)致唾液學(xué)非洲豬瘟病毒漏檢率稍高的重要因素之一。
3、唾液樣本的核酸保護(hù)：采集唾液樣本之前加入適量的樣本保護(hù)劑（Sample Protesis®），可以延長病原半衰期并保持唾液活性，含有保護(hù)液的唾液樣本可以冷藏/冷凍運(yùn)輸及保存。
4、唾液樣本的檢測要求：采集的唾液樣本要求清亮、透明并不得含有食物殘?jiān)?，故采樣之前的停食至關(guān)重要，原則上要求停食 12 小時(shí)以上。含有保護(hù)液的唾液中的核酸可以采用濃集法（concentration method）檢測，即離心唾液，試管底部取樣。
5、唾液樣本檢測對(duì)試劑盒的要求：由于口腔內(nèi)的非洲豬瘟病毒感染往往處于初始階段，病原核酸含量相對(duì)較低（CT 值在25～30 之間，未加保護(hù)液的唾液樣本 CT 值往往在 32 以上），所以對(duì)非洲豬瘟病毒核酸檢測試劑盒的敏感性要求較高，要求盡量能夠?qū)崿F(xiàn)單拷貝（single copy）檢測。
6) 陽性結(jié)果處置：對(duì)于唾液檢測中非洲豬瘟陽性結(jié)果（+），存 在兩種處置方案。一是嚴(yán)格剔除（“拔牙”，stamp out）陽性豬只，實(shí)現(xiàn)凈化生產(chǎn)。二是控制陽性豬群的移動(dòng)，嘗試實(shí)施早期帶毒生產(chǎn)（局部感染而非病毒血癥），終實(shí)現(xiàn)凈化生產(chǎn)。
很多養(yǎng)豬科技工作者把帶毒生產(chǎn)簡單理解為血液中可以帶毒是非常危險(xiǎn)的，也是禁止的。只有控制局部感染才有凈化豬群，消除病毒攜帶狀態(tài)的可能性。
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